Infecções respiratórias virais são a principal causa de hospitalização infantil e podem ser extremamente graves em crianças com cardiopatia congênita. O diagnóstico rápido e sensível é importante para a introdução precoce de tratamento antiviral e implantação de precauções para controle da transmissão, reduzindo o risco de infecções nosocomiais. Neste estudo, comparamos o desempenho de diferentes técnicas no diagnóstico de vírus respiratórios em crianças com cardiopatia congênita e sintomas respiratórios. Trinta e nove amostras de aspirado de nasofaringe foram obtidas de crianças com sintomas de infecção respiratória. Ensaio de PCR Multiplex que detecta 12 vírus respiratórios (Seeplex® RV 12 ACE Detection) foi comparado à Imunofluorescência Direta (IFD) e à PCR específica, ambas direcionadas a sete vírus. A positividade da IFD foi 33,3%, do Multiplex foi 51,3% e da PCR 48,7%. O índice kappa comparando IFD e Multiplex, IFD e PCR, e PCR e Multiplex foi, respectivamente, 0,542, 0,483 e 0,539, sendo a concordância considerada moderada. O Multiplex e a PCR detectaram significantemente mais vírus que a IFD (p < 0,0001 e 0,002, respectivamente). Como o desempenho dos testes varia o uso de mais de uma técnica pode aumentar a sensibilidade diagnóstica favorecendo a introdução precoce de terapia antiviral e implantação de medidas profiláticas

Respiratory virus infections are the main cause of infant hospitalization and are potentially severe in children with congenital heart disease (CHD). Rapid and sensitive diagnosis is very important to early introduction of antiviral treatment and implementation of precautions to control transmission, reducing the risk of nosocomial infections. In the present study we compare different techniques in the diagnosis of respiratory viruses in CHD infants. Thirty-nine samples of nasopharyngeal aspirate were obtained from CHD infants with symptoms of respiratory infection. The Multiplex PCR (Seeplex® RV 12 ACE Detection) driven to the detection of 12 respiratory viruses was compared with the direct immunofluorescence assay (DFA) and PCR, both targeting seven respiratory viruses. The positivity found by DFA, Multiplex and PCR was 33.3%, 51.3% and 48.7%, respectively. Kappa index comparing DFA and Multiplex, DFA and PCR and PCR and Multiplex PCR was 0.542, 0.483 and 0.539, respectively. The concordance between techniques was considered moderate. Both Multiplex PCR (p = 0.001) and PCR (p = 0.002) detected significantly more respiratory virus than DFA. As the performance of the tests may vary, the combination of two or more techniques may increase diagnostic sensitivity favoring the diagnosis of co-infections, early introduction of antiviral therapy and implementation of appropriate measures.

As complicações neurológicas causadas pelo Citomegalovírus (CMV) em pacientes com aids são raramente relatadas na era HAART. O objetivo deste estudo foi descrever as principais características clínicas e laboratoriais de pacientes com complicações neurológicas associadas ao CMV em pacientes com aids admitidos em centro de referência em Sao Paulo, Brasil. A doença citomegálica precisou da identificação do vírus no líquor mediante a reação em cadeia da polimerase (PCR). Treze casos foram identificados entre janeiro de 2004 e dezembro de 2008. A mediana da idade foi 38 anos e nove (69%) eram homens. Na admissão, todos os pacientes sabiam do seu status sorológico para o HIV e apenas quatro (31%) pacientes usavam HAART. A doença citomegálica foi a primeira doença definidora de aids em oito (62%) pacientes. As síndromes neurológicas identificadas foram: encefalite difusa (n = 7; 62%), polirradiculopatia (n = 7; 54%), encefalite focal (romboencefalite) (n = 1; 8%), e ventrículo-encefalite (n = 1; 8%). Sete (54%) pacientes apresentaram doença citomegálica fora do sistema nervoso e quatro (31%) tiveram retinite. A mediana da contagem de células CD4+ foi 13 células/µL. A mortalidade global durante a internação foi 38%. Oito pacientes usaram ganciclovir ou foscarnet (mortalidade: 50%) e cinco pacientes usaram ganciclovir e foscarnet (mortalidade: 20%). Nenhum paciente apresentou critérios diagnósticos da síndrome inflamatória de reconstituição imunológica. Quatro pacientes foram perdidos do acompanhamento ambulatorial e três pacientes apresentaram reconstituição imunológica e descontinuaram as profilaxias secundárias. Embora raras, as particulares síndromes neurológicas causadas pelo CMV continuam causando elevada mortalidade em pacientes com aids. A sobrevida depende do uso de terapia antiviral efetiva contra o CMV e a introdução oportuna do HAART.

Neurological disorders caused by Cytomegalovirus (CMV) in patients with Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) are rarely reported in the Highly Active Antiretroviral Therapy (HAART) period. The objective of this study was to describe the main clinical and laboratory features of patients with CMV-related neurological complications in HIV-infected patients admitted to a referral center in São Paulo, Brazil. CMV disease requires the identification of the virus in the cerebrospinal fluid (CSF) using Polymerase Chain Reaction (PCR). Thirteen cases were identified between January, 2004 and December, 2008. The median age of patients was 38 years and nine (69%) were men. At admission all patients were aware of their HIV status and only four (31%) patients were on HAART. Patients who were not on antiretroviral therapy before admission received HAART while inpatients. CMV disease was the first AIDS-defining illness in eight (62%) patients. The neurologic syndromes identified were diffuse encephalitis (n = 7; 62%), polyradiculopathy (n = 7; 54%), focal encephalitis (rhombencephalitis) (n = 1; 8%), and ventriculo-encephalitis (n = 1; 8%). Seven (54%) patients presented extra-neural CMV disease and four (31%) had retinitis. The median of CD4+ T-cell count was 13 cells/µL (range: 1-124 cells/µL). Overall in-hospital mortality was 38%. Eight patients used ganciclovir or foscarnet (in-hospital mortality: 50%) and five patients used ganciclovir and foscarnet (in-hospital mortality: 20%). None of the patients fulfilled the diagnosis criteria of immune reconstitution inflammatory syndrome. Four patients were lost to follow-up, and three patients presented immune recovery and discontinued secondary prophylaxis. Although infrequent, distinct neurological syndromes caused by CMV continue to cause high mortality among AIDS patients. Survival depends upon the use of effective antiviral therapy against CMV and the early introduction of HAART.

A prevalência de anticorpos e a incidência de infecção por citomegalovírus (CMV) foram estudadas em 98 crianças de 5 a 36 meses de idade que freqüentavam a creche de um hospital universitário em São Paulo. No início do estudo, a prevalência geral de anticorpos para o CMV foi de 44% (43/98). Obteve-se para o isolamento viral, amostras de saliva e/ou urina de 36 das 43 crianças que eram soropositivas, constatando-se que 55,6% das mesmas estavam excretando CMV em um dos materiais. Das 37 crianças inicialmente soronegativas, das quais foi possível obter nova amostra de sangue 6 a 12 meses após, 22 (59,5%) apresentaram soroconversão. A taxa de excreção viral na urina ou saliva nas crianças que soroconverteram foi de 52,4%. Estes resultados indicam que a infecção por CMV foi freqüente e ocorreu precocemente nas crianças que freqüentavam esta creche. Contudo, estudos controlados usando técnicas de epidemiologia molecular são necessários para definir mais precisamente o papel da creche na disseminação do CMV.

The prevalence of antibodies against cytomegalovirus (CMV) and the incidence of CMV infection were tested in 98 children aged 5 to 36 months who attended the day-care center of a University hospital in São Paulo. At the beginning of the study the overall prevalence of anti-CMV IgG antibodies was 44% (43/98). Saliva and/or urine samples were obtained from 38 of the 43 children that were seropositive at the beginning of the study for isolation of the virus, and 52.6% of these children were found to excrete CMV in one of the two materials. Among the 37 children that were initially seronegative from whom it was possible to obtain a new blood sample 6 to 12 months later, 22 (59.5%) presented seroconversion. The rate of viral excretion through urine or saliva from the children that seroconverted was 50%. These results indicate that CMV infection is frequent and occurs early among the children who attend this day-care center. However, controlled studies using molecular epidemiology techniques are needed to define more precisely the role of day-care centers in CMV dissemination.

Com o objetivo de determinar a prevalência da infecção pelo Citomegalovírus (CMV) em pacientes com AIDS, bem como relacionar os achados clínico-virológicos decorrentes desta infecção com as repercussões anatomopatológicas, estudamos 50 pacientes adultos atendidos entre abril de 1986 a junho de 1987, em dois hospitais públicos de São Paulo (HSP e HSPE). Estes pacientes foram acompanhados clínica e laboratorialmente, por período médio de 2 meses com coletas seriadas de sangue, urina e saliva. Foram realizados isolamento do CMV em monocamadas de fibroblastos humanos e testes sorológicos de Imunofluorescência Indireta (IFI-IgG/IgM) e Reação Imunoenzimática (ELISA-IgG). No momento da admissão no estudo 20% (10/50) dos pacientes apresentavam anticorpos IgM CMV específicos e 100% (50/50) deles anticorpos IgG (IFI). Durante o acompanhamento, 5 pacientes inicialmente IgM negativos tornaram-se IgM positivos, sugerindo reativação ou reinfecção pelo CMV. O CMV foi isolado de sangue periférico em 12,5%, da urina em 23,2%, da saliva em 21,9% dos pacientes. Exames anatomopatológicos foram realizados em 24 pacientes, correspondendo a 60% dos pacientes que evoluiram para óbito durante o período de estudo. Corpúsculos de inclusão citomegálica característicos foram observados em 50% das necrópsias, sendo o aparelho digestivo, pulmões e supra-renais os sítios mais acometidos. Não se observou uma relação estatisticamente significante entre os achados clínicos e os achados virológicos e anatomopatológicos.

Between April 1986 and June 1987, 50 patients meeting the CDC criteria for AIDS were studied for serological and virological evidence of CMV infection. Attempts for virus isolation from peripheral blood, urine and saliva were performed in cell culture lines of human foreskin fibroblasts and CMV specific IgG and IgM were assayed by IFI and IgG by ELISA. A total of 121 blood, 119 urine and 96 saliva samples were collected. During the study period viremia was noted at least once in 12,5%, viruria in 23,2%, and excretion in saliva in 21,9%. When admitted in the study, 20% (10/50) of the patients had anti-CMV IgM antibodies and 100% (50/50) of them had IgG anti-CMV antibodies (IFI). Five of the 40 patients IgM negative at admission presented anti-CMV IgM antibodies during the study, suggesting CMV reactivation or reinfection. Active CMV infection based on virus isolation and/or IgM positivity was demonstrated in 60% of the patients. Histopathological studies were performed in 24 patients. CMV was found in 50% of the autopsies, mainly in the digestive system, lungs and adrenals. There was no correlation between clinical, virological (serology and isolation) and histopathological diagnosis.

Com o objetivo de se avaliar a magnitude da infecção perinatal pelo citomegalovírus em hospital público do município de São Paulo, os autores acompanharam prospectivamente 98 recém-nascidos até o quarto mês de vida. Amostras de urina foram coletadas ao nascimento e posteriormente a cada mês, para inoculação em tubos contendo fibroblastos humanos. Amostras de sangue foram coletadas ao nascimento, no segundo e quarto mês de vida para pesquisa de anticorpos IgM específicos para o CMV, pelo método de imunofluorescência indireta. Dos 37 recém-nascidos que foram acompanhados até o quarto mês de vida, 9 se infectaram neste período, com diagnóstico feito pelo isolamento do CMV. O risco de aquisição da infecção pelo citomegalovírus no período perinatal estimado pela tábua de sobrevivência foi de 30,9%. A pesquisa de anticorpos IgM por imunofluorescência indireta só permitiu tal diagnóstico em 2 casos (8,1%). A diferença observada entre os dois métodos foi estatisticamente significante (p = 0,015). O estudo da prevalência de anticorpos IgG pelo ensaio imunoenzimático nas mães das crianças mostrou taxas de 92,7%. Não se isolou CMV nas amostras de leite materno, coletadas mensalmente até o terceiro mês de lactação. O acompanhamento clínico evidenciou que as crianças infectadas apresentaram-se de forma assintomática e com desenvolvimento neurop-sicomotor normal até o quarto mês.

In order to demonstrate the occurrence of CMV perinatal infection in a middle socioeconomic class population, the authors conducted a 8-month prospective study in 37 children, not infected congenitally, born in a public hospital of São Paulo city, Prevalence of CMV-IgG antibodies in mothers, detected by immunoenzimatic assay (ELISA), was 92.7%. Survival analysis showed that the risk of acquiring CMV perinatal infection diagnosed by virus isolation in human fibroblasts was 30.9%. When the diagnostic method was detection of IgM class antibodies by indirect immunofluorescence the risk was 8.1% (p < 0.05). Milk samples inoculated in human fibroblasts failed to demonstrate the presence of virus. The infected children did not present any signal of disease in a 4-month follow-up.

De janeiro de 1988 a janeiro de 1989 todos os pacientes submetidos a transplante de coração ou de medula óssea no Instituto do Coração do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo foram estudados quanto à incidência e morbidade das infecções pós-transplante causadas por vírus do grupo herpes. Cinco recipientes de medula óssea e 5 transplantados cardíacos foram observados por um período médio de 4.2 meses após o transplante. Todos os pacientes tinham sorologia positiva para citomegalovírus (CMV) antes do transplante e 80% desenvolveram uma ou mais recorrências durante o período de observação. Dos 12 episódios de infecão por CMV detectados neste estudo, 83% foram acompanhados por alterações clínicas ou laboratoriais. Apenas um caso apresentou doença grave. A incidência de infecções causadas por vírus Herpes simplex (HSV), foi de 50%. Apesar da maioria das reativações do HSV fossem representadas por lesões orais ou genitais, houve também um caso de hepatite por HSV. Um dos 6 episódios de infecção, por HSV que foram tratados com aciclovir não respondeu ao tratamento. Posteriormente, o paciente se beneficiou com o uso de ganciclovir. Todos os indivíduos apresentavam antes do transplante anticorpos anti-vírus da varicela zoster. Porém, não houve nenhum caso de reativação. Este estudo realça a importância do controle diagnóstico ativo das infecções por herpes-vírus em pacientes transplantados. Tanto as infecções causadas por CMV como por HSV mostraram alta incidência e grande morbidade indicando a necessidade de quimioprofilaxia.

From January 1988 to January 1989 all the heart transplant and bone marrow recipients at the Instituto do Coração of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo Medical School were studied for the incidence and morbidity associated with herpesviruses infections after transplantation. Five bone marrow and 5 heart transplant recipients were followed for a mean of 4.2 months post-transplantation. All the patients were seropositive for cytomegalovirus (CMV) before admission and 80% experienced one or more recurrences during the observation period. Of the 12 episodes of CMV infection, that were identified in this study, 83% were accompanied by clinical or laboratory abnormalities. However, there was only one case of severe disease. The overall incidence of infection for herpes simplex (HSV) was 50%. Although most of HSV reactivations were oral or genital, one case of HSV hepatitis occurred. One of the 6 episodes of HSV infections that were treated with acyclovir showed an unsatisfactory response and was successfully managed with ganciclovir. All the individuals had anti-varicella zoster virus antibodies, but none of them developed infection. The study emphasizes the importance of active diagnostic surveillance of herpesvirus infections in transplant patients. Both CMV and HSV reactivations showed high incidence and important morbidity and thus, deserve prophylactic therapy.

Entre novembro de 1980 e julho de 1982, 1614 recém-nascidos (RNs) de nivel sócio-econômico médio e 1156 RNs de baixo nível sócioeconômico foram examinados para verificar a ocorrência de infecção congênita pelo citomegalovírus (CMV), através de isolamento do vírus em amostras de urina ou detecção de anticorpos IgM específicos em amostras de sangue de cordão umbilical. Na população de baixo nível sócio econômico a prevalência de anticorpos fixadores do complemento (Ac Fc) anti-CMV nas mães foi de 84,4% (151/179) e a incidência de infecção congênita determinada por isolamento do vírus foi de 0,90% (5/508). No grupo de RNs em que o diagnóstico baseou-se apenas na detecção de Ac IgM CMV-específicos no sangue de cordão a incidência de infecção congênita foi de apenas 0,46% (3/648). Na população de nivel sócio-econômico médio a prevalência de Ac Fc anti-CMV nas mães foi de 66,5% (284/427) e a incidência de infecção congênita foi de 0,39% (2/518) no grupo de RNs testados por isolamento de vírus na urina e 0,18% (2/1090) no grupo testado por detecção de Ac IgM específicos. No presente estudo nenhum dos 12 RNs infectados congenitamente apresentou sinais ou sintomas de doença ao nascimento.

In São Paulo, Brazil, between November 1980 and July 1982, 1614 newborns of middle socioeconomic background and 1156 newborns of low socioeconomic background were examined for the occurrence of congenital cytomegalovirus (CMV) infection by isolation of virus from urine samples or detection of specific anti-CMV IgM in umbilical cord serum tested by immunofluorescence. In the low socioeconomic population prevalence of CMV complement-fixing antibodies in mothers was 84.4%(151/179) and the incidence of congenital infection assessed by virus isolation 0.98% (5/508), as compared with 0.46% (3/648) in the group of newborns tested by detection of specific anti-CMV IgM in umbilical cord-serum. In middle socioeconomic level population prevalence of CMV complement-fixing antibodies in mothers was 66.5% (284/427) and the incidence of CMV congenital infection was 0.39% (2/518) in the group of newborns screened by virus isolation and 0.18% (2/1096) in the group tested by detection of specific anti-CMV IgM. In the present study none of the 12 congenitally infected newborns presented clinical apparent disease at birth.